革蘭氏染色法的步驟

革蘭氏染色法的步驟

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原理:革蘭氏染色可將所有細菌分為革蘭氏陽性菌du(G+)和革蘭氏陰性菌(G-)兩類，是細菌學中*常用的鑒別染色方法。這種染色法之所以能將細菌分為G+菌和G-菌，是因為一般認為革蘭氏染色是基於細菌細胞壁的特殊化學成分。

步驟：

(一)塗片固定

在幹淨的載玻片表麵中央滴加一滴蒸餾水，用接種環嚴格無菌技術操作，挑取培養物少許，置載玻片的水滴中，與水混合可以做成菌懸液並塗布成直徑約1cm的薄層。

(二)染色

在固定過的塗片菌膜上滴加草酸銨結晶紫染液，染色液應完全可以覆蓋企業整個形成菌膜，染色1min。

(三)水洗

染料到一定時間後，取載玻片使其成450度角，用小水流衝洗掉多餘的染料，染料被細菌吸附後殘留。

(四)媒染

塗層表麵用碘溶液覆蓋1分鍾。在媒染處理中，媒染劑與染料形成不溶性化合物，可增加染料與細菌的親和力。

(5)水洗，用吸水紙吸水。

用細小的水流速度緩慢衝洗細胞塗片上的染色液，用吸水紙吸幹。

(六)脫色

加95%酒精數滴，並輕輕搖動細胞計算脫色， 20s~30s後再充分水洗，吸去表麵水分。

(七)複染

蕃紅染色液染色10s後， 自來水衝洗。

(八)幹燥，鏡檢

染色結果顯示革蘭氏陽性菌為紫色，革蘭氏陰性菌為紅色。

擴展資料

標本幹燥後即固定，固定的目的有三個：

(1)殺死微生物，固定效應細胞結構。

(2)確保細菌能更牢固地附著在載玻片上，以免樣本被水衝走。

和(3)改變染料對細胞的滲透性，因為死的原生質體比活的原生質體更容易染色。

資料來源: 百度-克染色法百科全書

來源:百度百科-革蘭氏染色